Novo Nordisk, 1989 yılında Nordisk Gentofte A/S ve Novo Industri A/S adlı iki Danimarka şirketinin birleşmesiyle oluşmuştur. Nordisk Gentofte A/S, 1923 yılında Nobel ödüllü Danimarkalı bilim adamı Profesör August Krogh, başhekim H.C. Hagedorn ve kimyager A. Kongsted tarafından kurulmuştu. Şirketin kuruluş amacı Profesör Krogh’un, 1922 yılında ilk insülini üreten Kanadalı bilim adamları Banting ve Best’den aldığı üretim haklarını kullanmaktı. Birleşmeden önce Nordisk Gentofte A/S dünyanın üçüncü büyük insülin üreticisi ve önde gelen büyüme hormonu üreticilerinden biriydi. Novo Industri A/S ise 1925 yılında insülin üretmek üzere kurulmuştu. Birleşmenin hemen öncesinde dünyanın en büyük insülin ve sanayi enzimleri üreticisiydi. 

Bugün Novo Nordisk, hem insülin hem de sanayi enzimleri alanında dünyanın en büyük üreticisidir.